114小说网

第134章 黎明前的测序（第5页）

再次取出时，管底出现了一点点半透明胶状沉淀。

「RNA沉淀出来了。」程溪瑶隔着护目镜，眼睛亮了起来。

江河：「弃上清，加1毫升75%的冰乙醇洗涤沉淀。」

轻轻悬浮沉淀後，第三次离心。

7500转，5分钟。

最後，用移液枪极其小心地吸走所有的乙醇液体，将离心管敞口放置在超净台的通风处。

「风乾5分钟，不能干透，否则很难溶解。」

五分钟後，江河加入20微升RNase-free的水，轻轻吹打。

「去测浓度。」江河把样本递给陆晓林。

陆晓林拿着样本走到NanoDrop分光光度计前，取了一微升滴在检测基座上，放下悬臂。

电脑屏幕上立刻跳出一条曲线。

「浓度120ngμl，A260280比值2。02。」陆晓林声音迅速，「师弟，提取极其完美！纯度极高，没有蛋白和苯酚污染！」

陈浩几个人长长地松了一口气，互相对视了一眼。

做到了！

江河毫不犹豫，道：「立刻进行逆转录，RNA极易降解，必须马上把它变成稳定的A。」

「引物用什麽？」陆晓林问。

「用随机六聚体引物（RandomHexamers）做全转录本的逆转录。」

江河走到冰箱前，拿出逆转录试剂盒：「不需要特异性引物，我们在PCR阶段再用甲流通用的HA（血凝素）和NA（神经氨酸酶）保守区引物去钓出目标片段。」

看着手里的试剂，江河眼神微动。

其实，如果这真的是一种完全未知的全新病毒，今晚的这几个小时根本连门槛都摸不到。

光是引物设计就能卡死全中国最顶尖的实验室两周时间。

但他不一样。

他记得H1N1的基因图谱，也知道它的外膜蛋白弱点，包括它最容易被哪种引物扩增。

基本就等同於，拿着标准答案，反向推导解题步骤。

所以效率才能这麽高。

逆转录反应体系配制完毕。

放入PCR仪。

42℃孵育60分钟，70℃加热5分钟灭活逆转录酶。

淩晨5:30。

逆转录完成。

极其脆弱的RNA终於变成了相对稳定的DNA。